1984年，HUVEC细胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan从一段长约10-20cm的人正常颈带静脉中获取、建立。
SetsukoShioda等人研究发现，HUVEC细胞株18-30代的倍增时间为23.5个小时，24-27代的倍增时间为67个小时，27-30代的倍增时间为84个小时，32-34代的倍增时间为100个小时。 培养至40代后，细胞形态出现多样化，有些细胞变大或变小，有些细胞出现多核；细胞密度恢复、倍增时间延长。最后细胞在第54代停止生长，ATCC的预期消费也显示在50-60
2018年，Setsuko Shioda等人发现HUVEC细胞株（第31代）在贴壁汇合时细胞与细胞之间存在透明，这与典型的内皮细胞特征有所不同。
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将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中快速摇匀解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1- 2mL细胞后吹匀。然后将所有悬液加入培养瓶中培养过夜（或将悬细胞液加入10cm器皿中，加入约8mL细胞，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
细胞冻存
冻存条件
60基础培养基30FBS 10DMSO，液氮储存
推荐海星HyCyte?一步冻存液(即用型、无血清、吸取程序)
1.待细胞生长至可代的密度，即可准备冻存。
2.消化细胞，取少量细胞悬液计数。细胞悬液经250 g离心4分钟。
3.离心后达到上清，用左侧4℃预冷的冻存液重悬细胞。将细胞按比例或数量分装至冻存管中。一般冻存密度为(1.0~2.0)×106个/mL。
注意：?细胞长时间在非条件下放置会严重影响细胞培养如离心后用冻存液重悬计数，使细胞转移于4℃冰箱内，以切断细胞补充，更好的保持细胞状态。
4.如使用海星立即冻存液，冻存管直接直直插入-80℃冰箱“完成一步”冻存即可。如使用程序冻存液，需将冻存管放入提前预冷的程序联想盒后放入-80 ℃冰箱。
5. 24小时后可将冻存管转移到液氮进行长期保存。
?注意：?细胞不可长期保存在-80℃冰箱中。
细胞：内皮细胞培养基础细胞＋5 FBS＋1内皮细胞培养添加剂1 P/S
推荐传代比例： 1： 建议24小时后加速繁殖至液氮中。 3-1：4，每2-3天换液一次
培养条件：气相：95空气5CO?，温度：37℃
细胞密度达到80-90，即
1. 完全前置心肌、胰酶、PBS
2. 废弃培养去上清，用钙透明、镁离子的PBS润洗
3.加2ml消化液（0.25Trypsin-0.53mM EDTA货号：GUTP-R001）于培养瓶中，定位37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在细胞下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并死亡，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量细胞终止消化。
4.按6-8ml/瓶补加液，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
5. 将细胞悬液按1：2到1：4的比例分配到新的含8ml培养基的新培养皿中或者瓶中。
1.该细胞为有限传代细胞系，在体外培养可传20代。请注意代次控制。
2.该细胞培养影响较大，建议使用专用细胞。
3.永生化的人血管静脉内皮培养体系：内皮细胞基础培养基＋5 FBS＋1内皮细胞添加剂1 P/S。
推荐使用海星人血管静脉内皮细胞完全细胞，货号：
4.如选择使用其他品牌培养基，任选：
（1）内皮细胞基础培养基推荐：ScienCell（Cat.No.1001）
基本成分介绍：永生化的人静脉血管内皮培养体系是专门为血管内皮细胞体外培养设计的最关注其生长的细胞。无机化合物、激素、生长因子、微量营养和低浓度胎牛血清(5)。该培养基的配方能够选择性地促进正常血管内皮细胞体外培养中的营养和生长，并能达到最理想的营养
（2）胎牛血清推荐：HyCyte?干细胞预筛选胎牛血清（Cat.No.FBP-S001）
基本成分介绍：适用于有较高要求的细胞和较难获得的细胞，如血管内皮细胞。
（3）内皮细胞培养添加剂推荐：ScienCell（Cat.No.SC1052)
基本成分介绍：内皮细胞培养添加剂（ECGS）是一种从牛脑垂体提取的补充剂，含有培养血管内皮细胞所必需的生长因子、营养素和蛋白质。该补充剂最大限度地促进人的血管永生化内皮细胞（HUVEC）的生长，该因子的添加对维持永生化的人静脉静脉内皮细胞（HUVEC）形态至关重要。
（1）请务必使用两种以上推荐培养进行永生化的人颈部静脉内皮细胞（HUVEC）的培养，否则可能导致细胞无法增殖。
（2）T25瓶细胞由于运输过程影响细胞会产生的微小小黑点，不是污染问题，属正常现象，使用专用培养体系进行培养后黑点会逐步减少。
（3）永生化的人静脉血管内皮细胞（HUVEC）对血液的质量要求较高，请使用高品质胎牛血清进行培养。如细胞状态欠佳，将胎牛血清的浓度提高到10。