革蘭染色法\x0d\步驟：制片、染色、鏡檢\x0d\1、制片\x0d\塗片 ：取潔凈載玻片壹張，用接種環取生理鹽水2環，置於玻片上，接種環滅菌後，取細菌培養物少許與鹽水混勻，並塗成均勻薄膜塗片。如用液體材料，如痰、尿液、膿汁等可直接塗片，不必加生理鹽水。\x0d\幹燥 ：塗片最好在室溫下自然幹燥，必要時可將標本面向上，小心間斷地在弱火高處烘幹，但切勿緊靠火焰將塗膜烤枯。\x0d\固定：塗片幹燥後，將標本片在酒精燈上快速的來回通過三次，***約2s～3s，註意溫度不可太高，以塗片塗膜的反面觸及皮膚覺輕微燙覺即可。\x0d\固定目的：①殺死細菌；②使菌體與玻片粘附較牢，在染色時不致被染液和水沖掉；③菌體蛋白變性易著色。\x0d\2、染色\x0d\結晶紫初染 1 min → 盧戈氏碘液媒染 1 min → 95％酒精脫色 30sec～1 min → 稀釋石炭酸復紅復染 1 min，油鏡觀察\x0d\原理：\x0d\①革蘭陽性細菌細胞壁結構較致密，肽聚糖層厚，脂質含量少，乙醇不易滲入；革蘭陰性菌細胞壁結構較疏松，肽聚糖層少，脂質含量多，乙醇易滲入。 \x0d\②革蘭陽性菌的等電點低，革蘭陰性菌的等電點較高，在相同pH條件下，革蘭陽性菌所帶負電荷比革蘭陰性菌多，與帶正電荷的結晶紫染料結合較牢固不易脫色。 \x0d\③革蘭陽性菌細胞內含有大量核糖核酸鎂鹽，可與結晶紫和碘牢固的結合成大分子復合物，不易被乙醇脫色；而革蘭陰性菌細胞內含極少量的核糖核酸鎂鹽，吸附染料量少，形成的復合物分子也較小，故易被乙醇脫色。\x0d\結果觀察：紫色為陽性，紅色為陰性\x0d\影響因素\x0d\①操作因素：塗片太薄或太厚，固定時菌體過分受熱，以及脫色時間長短，都會影響染色結果\x0d\②染液因素：所有染液應防止染液蒸發而改變濃度，特別是盧戈碘液久存或受光作用後易失去媒染作用；塗片積水過多會改變染液濃度，影響染色效果\x0d\意義：\x0d\①鑒定細菌：可將細菌分為革蘭陽性菌（紫色）和革蘭陰性菌（紅色），\x0d\②觀察致病性：大多數G+菌以外毒素為主要致病物質，而G- 菌以內毒素為主要致病物質。兩者的致病機制和臨床表現各不相同，\x0d\③參考選擇抗菌藥物：大多數G+菌對青黴素、頭孢菌素等敏感；大多數G- 菌對氨基苷類抗生素如鏈黴素、慶大黴素等敏感。\x0d\用途：壹般細菌學檢查或鑒定\x0d\\x0d\我這個比較簡單概括，妳最好詳細化，比如染色步驟
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