1、配制營養瓊脂培養基：稱取營養瓊脂9.6g,加入300ml蒸餾水,加熱煮沸後將培養基導入錐形瓶,然後包紮滅菌(121°C,20min).
2、倒平板：在無菌環境操作下,將上述培養基倒入4個平板,並編號1,2,3,4.
3、制菌懸液：用5ml無菌移液管在無菌操作下,吸取3ml無菌水到菌種斜面,用接種環輕刮下菌苔,搗碎,塞上棉塞,振蕩片刻.
4、將抗生素稀釋成10-3,10-4,10-5,10-6四種不同稀釋度的梯度液.
5、取直徑1cm圓形濾紙若幹,取4個圓形濾紙分別放入10-3,10-4,10-5,10-6的抗生素溶液中浸泡壹會.
6、待平板凝固後接種,各取0.2ml菌懸液倒入平板中,用塗布棒抹勻.
7、在1,2,3,4,號已接種的平板中分別放入4個浸泡在10-3,10-4,10-5,10-6抗生素溶液中的濾紙片,並註意個紙片間的距離應較大.
8、培養,放入37°c恒溫箱中培養24h.
9、觀察測量並記錄數據,觀察抗生素濾紙周圍的透明抑菌圈,測量16個抑菌圈的大小,求算不同濃度抗生素濾紙抑菌圈的大小.