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《现代分子生物学》-朱玉贤版-阅读笔记

由于我本身是学计算机的,现在以及未来的研究方向主要是生物信息学。所以,仔细学习一下分子生物学存在必要,很多因为生物的实验原理以及生物学概念(转座子、增强子、顺式调节元件等)在看论文的时候如果没有接触过,很容易看的头大。本文涉及的主要对象是计算机专业,研究生物信息等领域的初学者。

废话就这么多了,我阅读的教材是朱玉贤的第4版,因为是从阅读到中间开始记录的。部分没有记录的章节要点稍后补全。

第5、6章主要讲常用的实验技术,对弄清生物相关的论文为什么要做某些实验,以及在要找相关的数据的时候,用哪种实验的数据都有帮助。

重组DNA通常是通过将特定的DNA片段整合到病毒或者载体等载体上,构成重组DNA,通过侵染注入或者某些形式进入后续细胞。 使第一步细胞能够表达DNA,通常目的有:合成

重组DNA的必备原料有:

部分载体具有多克隆位点:即包含多个限制性酶切位点,它们是外源基因的插入片段,通过多克隆位点可以实现多种不同的DNA重组,这样可以同时获得多种抗性。

蓝白斑筛选:DNA重组并可以在一张图片中内表达的菌落呈白色,而非转化的菌落呈蓝色。

细菌转化:将外源的DNA分子和载体进行重组后,需要将其载体载体内,通常如大肠杆菌等对重组后的DNA吸收能力较差,需要使用如氯化钙处理,才能够较好地吸收这些重组DNA,从而在随后的细胞内表达。

经过Cohen和Boyer等人的研究发现:某些高等生物如非洲爪蟾的基因,也可以通过DNA重组技术转移到原核细胞(如大肠杆菌)中,并能够成功表达。

由于DNA链的多标记每个呈现状态,放置在手势中,都会向线圈移动,移动的距离和构成DNA的数量相关,因为(符号带的继电器基本是相同的),由于其带的电荷量以及分子大小的不同,在瞬中迁移的迁移能力不同,迁移的距离也不同,故能够分离DNA片段。

通常介质对DNA片段的分辨能力与浓度有关。相同类型的介质,浓度梯度,局部的间隙越小,对DNA分子的分割能力越强,就可以分离更小尺寸的DNA片段。反之,浓度增大,只能分离长度更大的片段。

对于小型DNA片段(gt;50kb),普通的琼脂糖开关很难分离,因此发明了脉冲极化电极。

PCR是外部快速极化待定基因或DNA序列的常用方法,具体步骤如下:

基于聚合酶制造的PCR仪实际上就是一个温控设备,能够在变性温度,复性温度,延伸温度之间很好地进行控制。

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PCR反应五要素:引物(PCR引物为DNA片段,细胞内DNA复制的引物为一段RNA链)、酶、dNTP(脱氧核糖核苷三磷酸)、模板DNA和缓冲液(需要其中) Mg2)。

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