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全基因敲除

全基因敲除含義如下:

用含有壹定已知序列的DNA片段與受體細胞基因組中序列相同或相近的基因發生同源重組,整合至受體細胞基因組中並得到表達的壹種外源DNA導入技術。

研究歷程:

基因敲除技術是20世紀80年代發展起來的,是建立在基因同源重組技術基礎以及胚胎幹細胞技術基礎上的壹種新分子生物學技術。所謂胚胎幹細胞是從著床前胚胎(孕3—5天)分離出的內細胞團細胞,它具有向各種組織細胞分化的多分化潛能,能在體外培養並保留發育的全能性。

基因敲除和基因嵌入技術是上個世紀90年代出現的最新外源DNA導入技術。基因敲除是基因打靶技術的壹種,類似於基因的同源重組。指外源DNA與受體細胞基因組中序列相同或相近的基因發生同源重組,從而代替受體細胞基因組中的相同/相似的基因序列,整合入受體細胞的基因組中。

技術分類:

基因敲除分為完全基因敲除和條件型基因敲除(又稱不完全基因敲除)兩種。完全基因敲除是指通過同源重組法完全消除細胞或者動物個體中的靶基因活性,條件型基因敲除是指通過定位重組系統實現特定時間和空間的基因敲除。

理論來源:

基因敲除就是通過同源重組將外源基因定點整合入靶細胞基因組上某壹確定位點,以達到定點修飾改造染色體上某壹基因的目的壹種技術。它克服了隨機整合盲目性和偶然性,是壹種理想的修飾、改造生物遺傳物質方法。這項技術的誕生可以說是分子生物學技術上繼轉基因技術後又壹革命。

尤其是條件性、誘導性基因打靶系統的建立,使得對基因靶位時間和空間上的操作更加明確、效果更加精確、可靠,它的發展將為發育生物學、分子遺傳學、免疫學及醫學等學科提供了壹個全新的、強有力的研究、治療手段,具有廣泛的應用前景和商業價值。

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