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fitc荧光标记原理

fitc荧光标记原理如下:

FITC异硫氰酸荧光素是一种常用的标记抗体的方法。FITC一般为黄色。棕色或棕色粉末或模具,低温下可保存 在碱性条件下,FITC的碳酰胺键可与抗体上蛋白上的赖氨酸结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或抗体结合物。

抗体分子 可标记15~20个FITC分子。标记的抗体仍能保持与相应响应结合的能力,在荧光源急剧或蓝紫光的刺激下产生黄绿色荧光剂,通过荧光显微镜观察或使用流细胞仪进行分析,从而 定性、定位或定量标签。

FITC标记抗体方法

FITC标记抗体主要包括Marshall直接标记法、Chadwick间接标记法、改进标记法和消毒法。

FITC标记注意事项

1、温度.时间.pH.荧光素和蛋白质量等都是影响标记效率的因素,需要控制。

2、 荧光素及其标记抗体的操作过程中应注意避光,搅拌速度应适当避免产生气泡。

3、注意正确操作,使柱体均匀。柱面平整,无气泡。气泡。< /p>

4、上样和洗脱应为前切和后切。前切指柱顶缓冲液与文化平面相切时加样品,后切指样品与文化平面相切时加 冲洗缓冲液。

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