與生化怪物交鋒無數的勇士——克裏斯·雷德菲爾德
BSAA(生化危機應對部隊)北美支部所屬。從手槍到散彈槍，他可使用各種重型軍械。他強勁的體魄可供他使用十分霸道的近身格鬥技。
背叛他人無數的超凡男子——阿爾伯特·威斯克
黑色墨鏡是他的標誌性裝束，他那充滿威嚴與有板有範的容貌與姿態告訴人們何為徹底的冷酷。為了收集生物兵器的樣本，他壹直活躍在世界各地的暗影中。
在暗中活躍的搏鬥專家——漢克
他是作為搏鬥專家四處活躍的特殊工作部隊成員。無論多麽殘酷的任務他都必然能夠生還歸來，因此綽號“死神”。從上手的武器到擅長的格鬥風格，他樣樣在行知識全備。
生化危機雇傭軍中首次參戰!——克萊爾·雷德菲爾德
她是克裏斯·雷德菲爾德的妹妹。與哥哥壹樣擅長格鬥技巧，使用重型武器。狂野而充滿魅力的她，這次是在《生化危機雇傭軍》中首次登場。
充滿力量感的肌肉系角色——傑克·克勞薩
他擁有強韌的體魄，並且曾經活躍於特種部隊。擅長使用弓箭與RPG這類特殊武器作戰。同時也是壹名短刀達人。
經驗豐富的吉爾(BSAA)本作登場——吉爾·瓦倫蒂安
曾經在美國陸軍特殊部隊受訓。習得壹身爆炸拆彈的專門技術。與克裏斯在S.T.A.R.S時代開始便壹同組隊的女性隊員。
英姿颯爽的女隊員——瑞貝卡·查姆博斯
身著輕裝的她腰間的掛包中收納著全套急救裝備。可以應用豐富的體術技能、武器、道具、回復道具來進行戰鬥。初始裝備是可以使用特殊彈丸的小火箭炮(榴彈發射器?)。可以適應各色戰鬥。
有正義感的槍械狂熱愛好者——巴瑞·伯頓
對於壹切槍械都具備豐富的認知。在武器的挑選上，高性能高輸出狂熱者的經典選擇壹般是武士之刃，而此人更加偏愛的卻是大口徑44的左輪。
裏昂未登場原因明了：
3DS遊戲《生化危機：雇傭軍 3D》中的8位登場角色已經全部明了了，分別是克裏斯、威斯克、漢克、克萊爾、克勞瑟、吉爾、瑞貝卡、巴瑞。但系列中人氣很高的“裏昂”卻未在本作中登場。
因此，關於“裏昂沒有在《生化危機：雇傭軍 3D》中登場的原因”，Capcom的川田將央作出了以下解釋。
據稱，裏昂之所以沒有在本作中登場，是因為“他正在《生化危機：浣熊市行動》中忙的抽不開身”的緣故。《生化危機：浣熊市行動》是Capcom預計在2011年發售於PS3/Xbox 360雙平臺的系列新作。在這個遊戲中，裏昂將作為重要角色登場。
同時考慮到“巴瑞”在歐美等地區非常有人氣等因素，巴瑞是壹個身形龐大的巨漢，近戰十分得意，同時還很顧家，是個富有魅力的角色。因此決定將他作為最後壹名可用角色在本作中登場。