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常用染色劑的染色劑

1、細菌染色劑

配方壹 齊氏(Ziehl)石炭酸品紅染液

甲液 取石炭酸5克,溶解在95毫升蒸餾水中。

乙液 取0.3克堿性品紅,放入研缽中研磨,逐漸加入10毫升95%酒精,繼續淹沒,使它溶解。

將甲液和乙液混合後,搖勻,過濾,裝瓶,備用。

配方二 羅氏(Loeffler’s)美藍染液

甲液 取5克美藍,溶於100毫升95%酒精中,制成美藍—酒精飽和液。

乙液 取氫氧化鉀0.01克(或1%氫氧化鉀溶液1毫升),溶液也可用於放線菌染色,0.1%濃度可用於酵母菌染色。

配方三 革蘭氏(Gram’s)染液

用此液染色因先用甲液染色,再加乙液固定,用丙液處理,最後用丁液復染。四種液體的配方如下:

甲液(結晶紫液)

(1)結晶紫2克 95%酒精 20毫升

(2)草酸銨0.8克 蒸餾水 80毫升

使用錢江(1)、(2)液相混,靜置48小時後使用。

乙液(碘液)

碘1克 碘化鉀2克 蒸餾水 300毫升

將碘化鉀溶於少量蒸餾水中,然後加入碘,待碘全部溶解後,加水稀釋至300毫升。

丙液 95%酒精溶液

丁液(番紅花紅液)

2.5%番紅花紅酒精溶液 10毫升 蒸餾水 100毫升

2、細菌特殊染色劑

配方壹 芽孢染液 用此配方染色是用甲液染色後,用乙液復染。

甲液 取5克孔雀綠,加入少量蒸餾水,使它溶解後,用蒸餾水稀釋到100毫升,即成孔雀綠染液。

乙液 取番紅花紅0.5克,加入少量蒸餾水,使它溶解後,用蒸餾水稀釋到100毫升,集成番紅花紅復染液。

配方二 莢膜染液 此配方先用甲液染色,後用乙液復染。

甲液 取結晶紫0.1克,溶於少量蒸餾水後,加水稀釋到100毫升,再加入0.25毫升冰醋酸壹結晶紫染液。

乙液 取硫酸銅( )31.3克,溶於少量蒸餾水後,加水稀釋到100毫升,即成20%硫酸銅脫色劑。

配方三 鞭毛染液

甲液

飽和明礬溶液 2毫升 5%石炭酸溶液 5毫升

20%丹寧酸溶液 2毫升

乙液

堿性品紅11克 95%酒精 100毫升

使用前取甲液9毫升和乙液1毫升相混,過濾即可。

3、植物細胞壁染色劑

配方壹 纖維素細胞壁染液(Ⅰ)

取固綠0.1克,溶於100毫升95%酒精中,即成0.1%固綠—酒精溶液。

該液能染色纖維素細胞壁,還用於動植物中作漿質染色劑。

配方二 纖維素細胞壁染液(Ⅱ)

氯化鋅20克 碘化鉀6.5克

碘1.5克 蒸餾水加至100毫升

先把氯化鋅溶於少量蒸餾水中,再加入6.5克碘化鉀,在碘完全溶解後,用蒸餾水稀釋到100毫升,即成碘—氯化鋅溶液。

該染液能把細胞壁染成紫色,胞質染成淡黃色,胞核染成棕色。

配方壹 纖維素細胞壁染液(Ⅲ)

甲液 取1克碘和1.5克碘化鉀,溶於100毫升蒸餾水中,即成1%碘液。

乙液 取7份硫酸和3份蒸餾水相混,即成66.5%硫酸溶液。

染色時,在材料上滴加甲液,再加壹滴乙液,纖維素細胞壁就染成黃色。

配方四 木質化細胞壁染液(Ⅰ)

硫酸化苯胺(或鹽酸話本安) 1份

蒸餾水 70份 95%酒精 30份

硫酸 30份

將上述各組分相混,將細胞材料放入混合液裏染色,可是木質化細胞壁呈鮮黃或姜黃色。

配方五 木質化細胞壁染液(Ⅱ)

取間苯三酚4~5克,溶於100毫升95%酒精中,即成間苯三酚—酒精液。

先在材料上滴上1滴濃鹽酸,然後滴上間苯三酚—酒精液1滴,木質化的細胞壁就染上櫻紅或紫紅色。

配方六 木質化細胞壁染液(Ⅲ)

取1克番紅,溶於99毫升蒸餾水中,即成1%番紅溶液。

4、細胞質染色劑

配方壹 伊紅染液

伊紅染液壹般配用水溶液和酒精溶液兩種。

(1)取1克伊紅,溶於99毫升蒸餾水中,即成1%伊紅水溶液(市售紅墨水內含伊紅成分,可以用紅墨水稀釋液來代替本溶液)。

(2)取1克伊紅,溶於99毫升70%酒精中,即成1%伊紅—酒精溶液。

配方二 甲基藍染液

取1克甲基藍,溶於29毫升70%酒精中,加入70毫升蒸餾水,即成1%甲基藍染液。

配方三 亮綠染液

取0.5克亮綠,溶解在100毫升蒸餾水中,即成0.5%亮綠溶液。

5、細胞核染色劑

配方壹 甲基綠染液

取1克甲基綠,溶於99毫升蒸餾水中,加入1毫升冰醋酸。本染液能染細胞核,還用來染木質化細胞壁。

配方二 龍膽紫染液

取1克龍膽紫,溶於少量2%醋酸溶液中,加2%醋酸溶液,直到溶液不呈深紫色止。

配方三 美藍(亞甲基藍)染液

取0.5克美藍,溶於30毫升95%酒精中,加100毫升0.01%氫氧化鉀溶液,保存在棕色瓶內 。

此溶液能染細胞核,還用來染細菌、血和神經組織等。

配方四 硼砂—洋紅染液

取4克硼砂,溶於96毫升蒸餾水中。再加入2克洋紅,加熱溶解後煮沸30分鐘,靜置3日,用100毫升70%酒精沖淡,放置24小時後過濾。

此染液能染細胞核,還用來染糊粉粒和壹般動物、植物的整體染色,如水螅、血吸蟲等整體標本。

配方五 德氏(Delafield’s)蘇木精染液

甲液 取1蘇木精,溶於6毫升無水酒精中,即成蘇木精—酒精溶液。

乙液 取10克銨礬溶於90毫升蒸餾水中,即成10%銨礬水溶液。

取甲液逐滴加入到乙液中,用紙遮蓋,放在陽光明亮處,使它充分氧化。3~4天後將溶液過濾,在濾液中加入25毫升甘油和25毫升甲醇,保存在密閉玻璃瓶內。靜置1~2個月,待該液顏色變深時過濾,可長久保存。

本染液是染色體的優良染色劑,除能染細胞核外,還用來染纖維素、細胞壁和動植物組織。

配方六 席夫(Schiff’s)試劑

稱取0.5克堿性品紅,加到100毫升煮沸的蒸餾水中,再微微加熱5分鐘,不斷攪拌,使它溶解。在溶液冷卻到50攝氏度時過濾,濾液中加入10毫升1N鹽酸。再冷卻到25攝氏度時加入0.5克偏重亞硫酸鈉()或無水亞硫酸氫鈉( )。把溶液裝入棕色試劑瓶內,搖蕩後,塞緊瓶塞,放在黑暗中24小時。在溶液顏色退到淡黃色時,加入0.5克活性炭,用力搖蕩1分鐘,過濾後把濾液貯在棕色試劑瓶內,塞緊瓶塞,濾液應該是無色的。在使用時勿讓溶液長時間暴露在空氣中和見光(瓶外用黑紙或暗盒遮光)。如溶液變成紅色,即失去染色能力。

堿性品紅是較強的核染色劑,在孚爾根氏(Feulgen’s)反應中作為組織化學試劑,以檢查DNA。

6、染色體染色劑

配方壹 醋酸—洋紅染液

取45毫升冰醋酸,加蒸餾水55毫升,煮沸後徐徐加入洋紅1克,攪拌均勻後加入1顆鐵銹釘,煮沸10分鐘,冷卻後過濾,貯存在棕色瓶內。

配方二 醋酸—地衣紅染液

取45毫升醋酸,跟55毫升蒸餾水相混,加熱,徐徐加入地衣紅粉末1~2克,攪拌溶解後,緩緩煮沸2小時。冷卻後過濾,貯存在棕色瓶裏。

配方三 龍膽紫染液

取1克龍膽紫,用少量蒸餾水溶解後,加蒸餾水,稀釋到100毫升,保存在棕色瓶內。

配方四 甲苯胺藍染液

取0.5克甲苯胺藍,溶解在100毫升蒸餾水中,即成0.5%甲苯胺藍水溶液。

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